GLP-1(7-36)抑制ApoE-/-小鼠主动脉斑块面积及泡沫细胞内CD36、ACAT1表达及其效应研究

目的探讨GLP-1(7-36)对高脂饮食喂养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的发生发展及巨噬细胞来源的泡沫细胞内CD36、ACAT1表达的影响。 方法① 18~20 g的6~8周龄雄性ApoE-/-基因敲除小鼠实验分4组(n=10):普通饮食组、高脂饮食组、GLP-1(7-36)组、GLP-1(7-36)+Exendin(9-39)组。通过HE染色、油红O染色、免疫组化CD36、ACAT1抗体染色明确小鼠主动脉根部粥样硬化斑块的面积。②巨噬细胞实验分8组(n=4):空白对照组、泡沫细胞组、不同浓度GLP-1(7-36)组、GLP-1(7-36)+Exendin(9-39)组。RT-PCR检测各组细胞CD36、ACAT1 mRNA的表达；Western blot检测各组细胞CD36、ACAT1蛋白的表达；高效液相色谱法检测各组细胞总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)的含量；细胞免疫荧光分析CD36、ACAT1受体蛋白表达。 结果① 与空白对照组相比，泡沫细胞组CD36、ACAT1mRNA表达水平较高(P < 0.05)；与泡沫细胞组相比，GLP-1组CD36、ACAT1mRNA表达水平明显降低(P < 0.05)；与GLP-1组相比，GLP-1+Exendin组CD36、ACAT1mRNA表达水平较高(P < 0.05)；与空白对照组相比，泡沫细胞组CD36、ACAT1蛋白表达水平较高(P < 0.05)；与泡沫细胞组相比，GLP-1组CD36、ACAT1蛋白表达水平明显降低(P < 0.05)；与GLP-1组相比，GLP-1+Exendin组CD36、ACAT1蛋白表达水平较高(P < 0.05)；②HE、油红O染色 结果显示高脂饮食组斑块面积占主动脉内膜面积比例(30.3±3.8)%；GLP-1组斑块面积占主动脉内膜面积比例(15.1±4.3)%，与高脂饮食组相比较，GLP-1组主动脉斑块明显减少(P < 0.05)；GLP-1+Exendin组斑块面积占主动脉内膜面积比例(25.7±3.4)%，较GLP-1组内膜下可见大量的粥样斑块(P < 0.05)；GLP-1(7-36)降低小鼠主动脉CD36、ACAT1阳性细胞百分比表达水平(P < 0.05)。与空白对照组相比，泡沫细胞组TC、FC、CE含量较高(P < 0.05)；与泡沫细胞组相比，GLP-1组TC、FC、CE含量明显降低(P < 0.05)；与GLP-1组相比，GLP-1+Exendin组TC、FC、CE含量较高(P < 0.05) 结论GLP-1通过降低CD36、ACAT1的表达减少细胞内胆固醇的蓄积，抑制巨噬细胞泡沫化，最终达到抑制动脉粥样硬化斑块发生发展。