La résistance aux agents antimicrobiens des bactéries engagées dans la motilité de type swarming

La motilite de type swarming est caracterisee par la migration rapide et coordonnee d'une population bacterienne sur une surface. D s'agit d'un comportement social marque par une differenciation en cellules hyperallongees et multiflagellees, et par la production de biosurfactant. Le swarming partage des similitudes avec le biofilm, notamment son caractere multicellulaire et une implication des systemes de quorum sensing. L'une des caracteristiques importantes d'un biofilm est sa resistance elevee envers de nombreux agents antimicrobiens. Mes travaux ont consiste a verifier si cette propriete se retrouvait egalement chez les bacteries en swarming. Cinq especes ont ete choisies: Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Burkholderia thailandensis, Escherichia coli et Serratia marcescens. Les profils de resistance des cellules vegetatives et des cellules en swarming ont ete determines a l'aide d'antibiogrammes couvrant divers antibiotiques de familles differentes. D a ete trouve que les bacteries en swarming presentaient une resistance accrue envers tous les antibiotiques testes, sauf les peptides antimicrobiens. Ceci indique que la resistance aux antibiotiques est effectivement une caracteristique generale du swarming. Afin de mieux caracteriser le phenotype resistant des bacteries en swarming, P. aeruginosa PA14 a ete choisie comme bacterie modele. Des tests de resistance envers d'autres agents antimicrobiens comme les metaux lourds ont montre une plus grande resistance des bacteries en swarming envers l'arsenite. La resistance envers le triclosan a ete observee chez les bacteries en swarming de B. subtilis et E. coli. Le triclosan n'a pas pu etre teste avec P. aeruginosa etant donne sa resistance naturelle a ce biocide. Des mutants dans des pompes a efflux (genes mexA, mexC et mexE inactives) et un mutant dans un mecanisme de resistance associe au biofilm (gene ndvB mute) presentent la meme resistance que la souche sauvage PA14, suggerant que ces mecanismes ne sont pas impliques. Dans le but d'identifier des genes de P. aeruginosa PA14 impliques dans cette resistance associee au swarming, une banque d'environ 10 000 mutants a ete generee par insertion transpositionelle aleatoire. Suite au criblage d'environ 4 000 de ces mutants (couverture theorique de 40-45% du genome), aucun gene n'a pu etre mis a jour. Finalement, des tests de permeabilite utilisant une sonde fluorescente, le 1-N­ phenylnaphtylamine (NPN), ont revele que la membrane externe des bacteries en swarming de P. aeruginosa PA14 incorporait moins de NPN que celle des bacteries vegetatives. Ceci suggere qu'une reduction de la permeabilite membranaire serait un mecanisme de resistance associe au swarmbzg, du moins chez les bacteries a Gram-negatif. Etant plus facile a investiguer que les biofilms, le swarming peut par consequent representer un bon modele d'etude de la resistance aux agents antimicrobiens des comportements multicellulaires bacteriens.