Adaptation de l’ammonium enzymatique UV de BioMérieux ® sur automates Konelab TM

Introduction : l’ammonium circulant est relativement bas chez les sujets normaux, malgre sa production continue a partir du metabolisme endogene des acides amines. L’interet physiopathologique de la determination de l’ammonium plasmatique reside essentiellement dans ses relations avec l’insuffisance hepatique (d’origine cirrhotique ou neoplasique), ou encore le diagnostic et le pronostic du syndrome de Reyes. Objectifs : cette etude decrit une evaluation du dosage de l’ammonium par la methode enzymatique UV a la GLDH en point final adaptee sur automates Konelab TM. Methodes : la glutamate deshydrogenase (GLDH : EC.1.4.1.3) catalyse l’amination reductrice de l’α-cetoglutarate en presence de NH 4 + et de NADPH,H +, pour former le glutamate et le NADP +. La diminution de la concentration de NADPH,H +, directement proportionnelle a la concentration d’ammoniaque, est evaluee a 340 nm. Toutes les conditions ont ete reunies pour optimiser la methode, tout en couvrant un domaine de mesure satisfaisant. Resultats et commentaires : l’evaluation de la methode modifiee a montre une bonne precision (repetabilite : CV < 4 % ; reproductibilite interserielle : CV de 2,01 a 2,93 % ; reproductibilite intraserielle : CV egal a 0,67 %) ainsi qu’une fiabilite satisfaisante : le domaine de mesure s’etend de 27 a 250 μmol/L, avec une limite de detection (L D) egale a 0,325 μmol/L. Conclusion : la technique adaptee est simple, rapide, peu couteuse et surtout automatisable. Elle est par ailleurs fiable et surtout plus sensible, s’adaptant particulierement au dosage de l’ammonium plasmatique en urgence comme en routine au sein de notre laboratoire.