Simultane Bestimmung von IgG, Insulin und Transferrin in Kulturmedium mittels Tandem‐LC

Das Gram-positive Bakterium Bacillus megaterium bietet als industrielles Produktionssystem eine Reihe von Vorteilen gegenuber dem weit verbreiteten System Escherichia coli. Bacillus megaterium pMM1525 sekretiert das Enzym Levansucrase in das Medium. Das Enzym bewirkt den Transfer von b-d-Fructosylresten vom Donator Saccharose auf unterschiedliche Akzeptoren mit freier Hydroxylgruppe. Sowohl die Levanals auch die Oligosaccharidsynthese werden durch die Levansucrase katalysiert. Levan hat vielfaltige Eigenschaften, z. B. kann das Polysaccharid als Verdickungsmittel in Lebensmitteln eingesetzt werden und somit als Ersatz fur Hydrokolloide tierischen Ursprungs (Gelatine) dienen. Im medizinischen Bereich wird die Anti-Tumor-Wirkung der Substanz sowie deren Verdaubarkeit und Wirkung auf den Lipidstoffwechsel (Magen-Darm-Trakt) diskutiert. Um die Enzymproduktion des rekombinanten B. megaterium innerhalb unterschiedlicher Wachstumsphasen zu untersuchen, wurde ein Kessel-Reaktorsystem bestehend aus der Kombination eines 10-L-Kultivierungsund eines 500 mL-Testreaktors verwendet. Die beiden Reaktorkammern sind miteinander verbunden, wodurch ein standiger Austausch der Inhalte zwischen den Reaktoren moglich ist. Dieses Setup ermoglicht die vergleichende Durchfuhrung verschiedener Untersuchungen im selben Kultivierungsansatz. Mit diesem Versuchsaufbau wurde in erster Linie die Abhangigkeit der Produktivitat vom Medium, dem Selektionsdruck, der Temperatur, der Induktorkonzentration und dem Induktionszeitpunkt untersucht. In diesem Poster werden die erhaltenen Ergebnisse bei Variation der Prozesstemperatur in unterschiedlichen Medien prasentiert.