MBD1 RNA干扰对胰腺癌细胞株BxPC-3生长影响的实验研究

目的观察阻断MBD1表达后对胰腺痛细胞牛长增殖的影响，探讨MBD1在胰腺癌发生发展中的作用。方法采用RNA下扰技术，构建MBD1siRNA重组质粒，脂质体介导转染人胰腺癌细胞株BxPC3，RT-PCR和Western印迹检测转染前后MBD1 mRNA与蛋白的表达变化，MTT法检测转染前后BxPC-3细胞的生长曲线，将细胞接种于裸鼠，观察转染前后胰腺癌细胞体内移植瘤的生长情况。结果转染siRNA-MBD1质粒后胰腺癌细胞株BxPC～3MBD1的mRNA与蛋白表达水平明显降低。MTT法检测细胞的生长曲线，发现转染组较转染卒质粒组和未转染组生长明显缓慢（P〈C0．01）；体内实验显示，将转染前后的细胞接种于裸鼠，转染组移植榴生长速度明显较其他两组减慢（P〈0．01），RT-PCR检测移植瘤MBD1mRNA表达的变化，转染组中未能测到明显的MBD1表达。而转染组中CDH1、Rb等抑癌基因mRNA的表达明显高于转染空质粒组和未转染组。结论通过RNA干扰技术，可在转录和翻译水平降低MBD1在胰腺癌细胞株BxPC-3中的表达，并能抑制肿瘤细胞的生长，但其作用机制尚不清楚，MBD1介导的转录抑制作用可能在胰腺癌的发生发展过程中起到重要的作用。