Regulación de la citotoxicidad inducida por oleuropeína en células humanas de osteosarcoma: papel de la vía apoptótica Bax/Bcl-2

espanolLa dieta mediterranea es ampliamente consumida y aceptada en nuestra sociedad. La oleuropeina, uno de los principales componentes del aceite de oliva, ha sido objeto de estudio en numerosos trabajos, destacando aquellos que tratan sobre sus propiedades anticancerigenas. La agresividad de esta patologia y el crecimiento descontrolado que produce en las celulas hace que exista un gran interes biomedico que permita buscar nuevas estrategias para abordar esta enfermedad. En la primera parte de este estudio, se evaluo la actividad antiproliferativa de la oleuropeina en dos lineas celulares humanas de osteosarcoma (MG-63 y Saos-2). El analisis estadistico de IC50 por el metodo de regresion Probit sugirio que la oleuropeina tuvo efectos toxicos similares en ambas lineas celulares (rango de IC50 247.4-475.0 μM en MG-63 y 359.9-798.7 μM en Saos-2). Posteriormente, se estudio la via apoptotica Bax/Bcl-2 en las celulas humanas de osteosarcoma MG-63 carentes de p-53, tras ser expuestas a la oleuropeina. La actividad de caspasa-3 se midio mediante ensayo colorimetrico. Ademas, la expresion del mRNA de Bax, Bcl-2 y p-53 fue determinada por PCR en tiempo real despues de 24 horas de exposicion. Tanto la relacion entre la expresion del mRNA de Bax/Bcl-2 como la actividad de la caspasa-3 aumentaron en las celulas expuestas a la oleuropeina en comparacion con las del control no expuesto (P EnglishMediterranean diet is widely consumed and accepted in our society. Oleuropein, one of the main components of olive oil, has been investigated in numerous studies, especially those dealing with its anti-cancer properties. The severity of this pathology and the uncontrolled growth it produces in the cells lead to a great biomedical interest in exploring new strategies to efficiently confront this disease. This study evaluated the antiproliferative activity of oleuropein in two human osteosarcoma cell lines (MG-63 and Saos-2). IC50 statistical analysis by Probit regression method showed that oleuropein had similar toxic effects on both cell lines (IC50 ranges from 247.4-475.0 μM for MG-63 cells and from 359.9-798.7 μM for Saos-2 cells). Thereafter, the p-53-null MG-63 human osteosarcoma cells were exposed to oleuropein and the Bax/Bcl-2 apoptotic pathway was investigated. Caspase-3 activity was determined by a colorimetric assay. Furthermore, Bax, Bcl-2 and p-53 mRNA expression was assessed by real-time PCR following 24 hours of exposure. Both the ratio of Bax/Bcl-2 mRNA expression and caspase-3 activity were enhanced in cells exposed to oleuropein when compared to unexposed control cells (P