Effekte von Interferon-γ und TNF-α auf das Überleben und die Differenzierung von Oligodendrozyten-Vorläuferstufen

Fragestellung: Eine aszendierende intrauterine Infektion fuhrt uber die Freisetzung verschiedener Cytokine zu Schaden der weisen Hirnsubstanz unreifer Feten. In der vorliegenden Arbeit sollte deshalb der Einfluss von INF-γ und TNF-α auf das Uberleben und die Differenzierung von Oligodendrozyten-Vorlauferstufen untersucht werden. Methodik: Kulturen mit mehr als 90% A2B5-positiven Zellen wurden fur drei Tage in Proliferations-Medium (PDGF und bFGF) und anschliesend fur sechs weitere Tage in Differenzierungs-Medium (CNTF, Forskolin und T3) gehalten. Vom Kulturtag 1 bis 3 wurden die Zellen mit IFN-γ (100 U/ml) und TNF-α (100 ng/ml) behandelt. Der apoptotische Zelltod wurde am Kulturtag 3 mit TUNEL-Assay evaluiert. Alterationen der Zelldifferenzierung wurden durch Western-Blots fur die myelinspezifischen Proteine MBP, MAG und CNP, sowie durch Immuncytochemie fur die Oberflachenantigene A2B5 und MOSP nachgewiesen. Ergebnisse: Die Behandlung mit TNF-α und INF-γ induzierte in 11±2% der Zellen einen apoptotischen Zelltod. Bei den nach Cytokinexposition uberlebenden Zellen konnten keine fur die Ausdifferenzierung spezifischen Oberflachenantigene nachgewiesen werden. Auch blieb im Gegensatz zur Kontrollgruppe die Expression der Proteine MBP, MAG und CNP aus. Schlussfolgerung: Entzundliche Zytokine induzieren nicht nur Apoptose in Oligodendrocyten-Vorlauferzellen sondern behindern auch die weitere Ausdifferenzierung dieser Zellinie.