Activités anticoagulante et antithrombotique de polysaccharides sulfatés

Les fucanes sont des polysaccharides sulfates extraits d'algues brunes et doues d'activite anticoagulante. Les carboxymethyl dextrane benzylamide sulfonates (cmdbs), polysaccharides synthetiques egalement pourvus d'une activite anticoagulante sont prepares a partir de dextrane par substitution statistique de fonctions hydroxyles par des fonctions chimiques carboxymethyles, benzylamides, sulfonates et sulfates. L'activite anticoagulante des fucanes et des cmdbs depend de leur composition chimique, notamment du taux de groupements sulfates, et de leur masse molaire. Ces composes catalysent preferentiellement la reaction d'inhibition de la thrombine par le second cofacteur de l'heparine, mais aussi par l'antithrombine. Le but de ce travail a ete d'etudier les mecanismes d'action impliques dans l'activite anticoagulante de ces deux polysaccharides, compares aux heparines. Des tests de generation de thrombine ont ete realises en plasma humain en presence de fucane et de cmdbs. Une inhibition de la generation de thrombine est obtenue apres activation de la phase contact en presence des deux polysaccharides, avec une phase de latence prolongee precedant la generation de thrombine, par rapport au temoin. La generation de thrombine obtenue apres activation par le facteur tissulaire, est inhibee par le fucane et les cmdbs, avec un allongement de la phase de latence uniquement en presence de cmdbs. L'etude cinetique des reactions d'inhibition des facteurs ixa et xa par l'antithrombine a permis de mettre en evidence un effet catalytique faible de ces composes par rapport aux heparines. La determination des constantes de dissociation des complexes du fucane ou du cmdbs avec chaque proteine (enzyme ou inhibiteur), associee a l'utilisation d'un modele cinetique permet d'emettre l'hypothese de la formation d'un complexe prealable du fucane avec l'inhibiteur, avant la formation du complexe stable enzyme-inhibiteur. Le cmdbs formerait un complexe prealable avec l'enzyme. L'activite antithrombotique du fucane a ete mise en evidence dans un modele de thrombose veineuse de type Wessler chez le lapin. Une dose vingt fois plus importante de fucane que d'heparine est necessaire pour obtenir le meme effet antithrombotique, mais l'effet du fucane est plus prolonge