Cáncer de ovario: alteraciones de la metilación del dna y papel como biomarcador epigenético del gen de la metaloproteinasa adamts19

El estudio de las alteraciones epigeneticas y la identificacion de nuevos marcadores diagnosticos y predictivos, y el analisis de los mecanismos de quimiorresistencia en el cancer de ovario son relevantes para un mejor conocimiento sobre este cancer, y pueden ser utiles en la busqueda de nuevos tratamientos, mas eficaces, y menos toxicos, y acercarnos asi al objetivo ideal de una medicina personalizada del cancer. En esta tesis doctoral se llevo a cabo: 1) un estudio de las alteraciones en la metilacion del DNA en cancer de ovario mediante DNA fingerprinting y sequenciacion por bisulfito. 2) un analisis de la metilacion del gen de la metaloproteinasa ADAMTS19 como posible biomarcador epigenetico de diagnostico para el cancer de ovario, y 3) un estudio de los mecanismos de quimiorresistencia en lineas celulares de cancer de ovario resistentes a cisplatino y a doxorrubicina. Los metodos utilizados incluyen DNA fingerprinting por Methylation-sensitive Amplified Fragment Length Polymorphism (MS-AFLP) y secuenciacion por bisufito y COBRA, y DNA arrays de expresion en lineas tumorales de ovario. Los resultados mas relevantes son: 1. La correlacion del grado de desmetilacion con la edad no es estadisticamente significativa, posiblemente por el bajo numero de casos estudiados. Por tanto, queda por clarificar si el modelo de wear & tear se aplica al cancer de ovario en un numero menor de casos de los que parece hacerlo en canceres de origen gastrointestinal. Se identificaron nuevos loci con porcentajes elevados tanto de hipermetilacion como de hipometilacion en cancer de ovario, algunos de los cuales parecen especificos de este cancer y otros mas universales. Un ejemplo de este ultimo subgrupo es el de FOXD3, hipermetilado en un porcentaje elevado de tumores de ovario y de colon. Resultados preliminares muestran la funcionalidad de la metilacion y sientan las bases para estudios subsiguientes de caracterizacion mas detallada de loci de interes cuyas alteraciones epigeneticas (tanto hipermetilacion como desmetilacion) puedan tener implicacion en la patogenesis del cancer de ovario. 2. ADAMTS19 se encuentra significativamente mas metilado en las metastasis de canceres de colon a ovario y omentum, que a higado y pulmon. Esta asimetria en la tendencia metastatica presenta aplicaciones potenciales de caracter diagnostico y predictivo. En cancer de ovario, la metilacion de ADAMTS19 es altamente especifica de los tumores de tipo mucinoso lo que en principio la convierte en un util marcador diagnostico y discriminatorio de este tipo de tumores. 3. La quimiorresistencia en las lineas celulares de cancer de ovario A2780cis y A2780ADR esta mediada por alteraciones en vias comunes de senalizacion importantes en la oncogenesis como la via de JNK y de p53, en FOXO1 o deficiencias en el sistema de reparacion MMR. En A2780ADR, la resistencia a distintos tipos de drogas, como el cisplatino y la doxorrubicina, parece ser debida a la sobreexpresion de la bomba de extrusion ABCB1 y posiblemente a la suma de otros mecanismos de resistencia comunes a A2780cis. La diseccion de los mecanismos subyacentes a la quimiorresistencia en este sistema experimental in vitro, puede tener aplicaciones en el tratamiento del cancer de ovario.