RP-HPLC法检测发酵液中赤霉素GA4,GA7的含量

2013 
建立了反相高效液相色谱法(RP—HPLC)测定发酵液中赤霉素GA4,GA7的方法。探讨了流动相缓冲盐与甲醇的比例、缓冲盐pH、温度、流速等对两种赤霉素分离的影响,结果表明在Kromasil C,8(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱下,以V(甲醇):V(pH3.0,0.05mol/LKH2P04)=60:40为流动相,柱温350℃,流速1.0ml Mmin,检测波长228nm,进样量20此,分离度良好。GA4,GA7标准品质量浓度分别在0.1—8.0mg/mL,0.1—3.0mg/mL范围内线性关系良好,线性回归方程为Y4=1.58878±7.06978x4,K=0.48281+7.12931×7;GA4,GA,检出限分别为19.6,14.3Izg/mL,平均加标回收率分别为98.8%,99.9%,相对标准偏差RSD分别为1.5%,0.34%。
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