Selection and genetic analysis of pseudohyphae defective mutants with attenuated virulence in Candida Lusitaniae

Selection et analyse genetique de mutants deticients pour la Objectif. Cette etude avait pour but de determiner s'il existait une relation entre la pseudofilamentation et la virulence chez la levure Candida lusitaniae. Materiel et methodes. Apres avoir etudie les conditions nutritionnelles qui permettaient d'obtenir des pseudofilaments in vitro, des mutants deficients pour la pseudofilamentation - spontanes et induits par l'ethyl methanesulfonate - ont ete selectionnes et analyses par croisements genetiques. La virulence d'un mutant et de la souche sauvage dont il derivait a ensuite ete comparee in vivo sur deux races de souris, puis les capacites d'adhesion de ces souches sur des cellules humaines ont ete evaluees in vitro. Resultats. Nous avons montre que: (i) La formation de pseudofilaments etait declenchee in vitro par une carence en ions ammonium et en glucose. (ii) Des mutants spontanes et induits devaient porter des mutations dans au moins deux genes differents pour etre completement deficients pour la pseudofilamentation, et que, alternativement, ils pouvaient devenir sexuellement steriles. (iii) Un mutant deficient pour la pseudofilamentation avait une virulence attenuee chez la souris par rapport a la souche sauvage dont il etait issu. L'etude histologique des reins de souris a montre que les organes infectes par la souche mutante ne contenaient que tres peu de levures isolees, alors que les reins infectes par la souche sauvage presentaient un niveau de colonisation important. Neanmoins, la presence de pseudofilaments dans le tissu renal infecte par la souche sauvage n'a pas ete mise en evidence. D'autres experiences ont demontre que les capacites d'adhesion des cellules du mutant etaient diminuees par rapport aux cellules sauvages. Conclusion. Nos observations suggerent que la pseudofilamentation en elle-meme n'a probablement pas de role direct dans la virulence de C. lusitaniae, et que l'expression d'autres genes impliques dans la virulence a pu etre affectee par les mutations qui sont a l'origine de la deficience de la pseudofilamentation.