短片段PCR—ELISA液相杂交法的建立及检测HBV YMDD变异的研究

目的：建立短片段PCR－ELISA技术，检测HBV P基因C区变异位点，以了解拉米呋啶治疗过程中与HBV耐药有关突变株的产生。方法：通过定点诱变获得的重组质粒作为标准对照，采用短片段PCR－ELISA方法对拉米呋啶治疗的60例乙肝患者血清标本进行HBV聚合酶P基因的变异检测同时观察其HBV DNA的定量，肝功能指标的变化，结果：所测60份血样中有8份检出突变株，经测序证实YMDD变异存在，其中4例由ATGR变为GTG，1例变为ATT，3例变为ATC，并出现HBV DNA定量反跳及肝功能的变化，结论：短片段PCR－ELISA法监测乙肝病毒YMDD变异，其方法与一般PCR相比，时间仅为其五分之一，且具有更好的特异性。