Estabilidade de lipase de Aspergillus niger na presença de polímero

Introducao: As lipases sao enzimas que catalisam a reacao de hidrolise de ligacoes esteres de triacilglicerois em acidos graxos e glicerol. Estas enzimas apresentam ampla aplicacao industrial, tais como industria farmaceutica, alimenticia, quimica, etc. A estabilidade das lipases pode variar de acordo com a sua origem e os aminoacidos que a formam. Desta maneira, conhecer a estabilidade desta molecula em diferentes solventes e de interesse, considerando extracao das mesmas de meio fermentado quando produzidas por microrganismos ou em sua solubilizacao na etapa de aplicacao. Objetivo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a estabilidade da lipase produzida por Aspergillus niger quando exposta aos polimeros Polietileno glicol (PEG) 600 g/mol, Polipropileno glicol (PPG)425 e 725 g/mole Poliacrilato de sodio (NaPA) 8000 g/mol. Metodologia: Para determinacao da estabilidade da enzima nos diferentes polimeros, foram feitos ensaios em diferentes concentracoes para cada polimero. O NaPA foi preparado nas concentracoes de cinco, dez e quinze por cento (%), tanto em agua com em tampao mcllvaine com pH 5,5. Ja os polimeros PEG 600, PPG 425 e 725 ambos foram preparados nas concentracoes de vinte, trinta, quarenta e cinquenta por cento (%) tambem no mesmo tampao. A atividade lipolitica foi determinada pelo metodo do pnpp, com leitura da absorbância a 398 nm. Resultados e Discussao: Depois de realizar todos os procedimentos nos diferentes tempos, e a leitura em 398 nm, as absorbâncias coletadas, que sao comparadas com um branco onde so contem os polimeros sem a enzima estudada, sao tabeladas para analise de concentracao de enzima em cada concentracao e em cada polimero analisado. Tambem e feita a comparacao da atividade da enzima em uma solucao sem a adicao de polimero. A partir dos resultados podemos analisar que tanto o NaPA quanto o PPG 725 inibiram a atividade da enzima, onde o NaPA apresentou na concentracao de 5% uma atividade, no final do experimento, de 0,36 em agua e 0,40 em tampao. Mesmo com o aumento das concentracoes do polimero nao ocorreu aumento significativo da atividade da enzima. Para o PPG 725 o ensaio realizado em tampao teve como maior atividade 2,11 unidades de atividade e o realizado em solucao aquosa obteve coo maior atividade 1,79 unidades de atividade. Ao contrario do PEG 600 e do PPG 425. O PEG 600 obteve a maior atividade da enzima em sua concentracao de 20%, com uma atividade de 9,96 (unidades de atividade). O PPG 425, por sua vez, obteve a maior atividade enzimatica na concentracao de 60% com uma atividade de 9,50 (unidades de atividade). Ocorreu variacao dos resultados de acordo com a mudanca de concentracao dos polimeros, porem nada que afetaria os resultados conclusivos de que tanto o NaPA quanto o PPG 725 inibiram a atividade da enzima. Conclusao: Os polimeros que nao desestabilizaram a lipase foram PEG 600 g/mol e o PPG 425 g/mol. Desta maneira, pode-se concluir que estes polimeros podem ser empregados juntamente com a lipase e que podem ser constituintes de Sistemas Polimericos de Duas Fases Aquosas para extracao de lipases do meio fermentado.