Nanopartículas poliméricas e de prata : avaliação da toxicidade in vitro e in vivo e do processo de cicatrização em animais submetidos à queimadura térmica

Queimaduras representam um problema de saude publica, gerando um gasto anual de cerca de R$ 55 milhoes ao Sistema Unico de Saude (SUS). Os produtos destinados ao tratamento de queimaduras sao em sua grande maioria importados, tornando relevantes estudos que visem ao desenvolvimento de materiais com caracteristicas adequadas ao tratamento e produzidos a partir de materias-primas de baixo custo e facil obtencao. O objetivo deste trabalho foi avaliar os possiveis efeitos toxicos e o potencial de cicatrizacao de S-Nitrosoglutationa (GSNO) encapsulado em nanoparticulas polimericas (alginato-quitosana e poli (?-caprolactona) (PCL) recobertas por quitosana) e de nanoparticulas de prata (AgNPs). O GSNO foi sintetizado atraves de reacao de S-Nitrosacao direta de glutationa e caracterizado por espectrofotometria. As nanoparticulas de alginato-quitosana (AG/CS) contendo GSNO foram preparadas atraves do metodo de gelificacao ionica. As nanoparticulas de PCL recobertas por quitosana (PCL/CS) e contendo GSNO foram preparadas atraves do metodo de dupla emulsao (agua/oleo/agua) e evaporacao do solvente. Ambas as nanoparticulas foram caracterizadas por espectroscopia de correlacao de fotons (ECF) e microscopia eletronica de varredura (MEV). As AgNPs foram produzidas extracelularmente por metodo biotecnologico utilizando-se o fungo Fusarium oxysporum e caracterizadas por ECF e microscopia eletronica de transmissao (MET). A toxicidade in vitro das nanoparticulas foi avaliada atraves de ensaios de citotoxicidade utilizando-se cultura de celulas de linhagens pre-estabelecidas e o potencial de cicatrizacao foi avaliado atraves de inducao de queimadura termica em ratos Wistar machos, os quais foram posteriormente eutanaziados para avaliacao da toxicidade in vivo das nanoparticulas. As AG/CS contendo GSNO apresentaram diâmetro medio de 321,0 ± 12,2 nm e potencial Zeta de +37,6 ± 0,6 mV. As PCL/CS contendo GSNO apresentaram-se esfericas, com diâmetro medio de 448,6 ± 35,38 nm e potencial Zeta de +23,11 ± 4,75 mV. As AgNPs apresentaram-se esfericas e altamente estaveis, com diâmetro medio de 7,3 ± 3,0 nm e potencial Zeta de -31,1 ± 2,09 mV. As nanoparticulas apresentaram-se pouco toxicas in vitro e in vivo. O tratamento das lesoes com as nanoparticulas reduziu a area lesionada em praticamente 100% apos 35 dias, diminuindo o tempo necessario para a diferenciacao de fibroblastos em miofibroblastos, e revertendo o processo inflamatorio mais rapidamente. Nossos resultados indicam que os sistemas nanoparticulados estudados podem fornecer uma nova e eficaz direcao terapeutica para o tratamento de queimaduras. Abstract