Les approches lipidomiques et métabolomiques identifient les MAM (mitochondria-associated membranes) comme la cible cellulaire du mitotane

Le mitotane (o,p’-DDD), standard du traitement du corticosurrenalome impacte les fonctions mitochondriales mais sa cible moleculaire reste inconnue. Nous avons utilise des techniques de metabolomique et de lipidomique pour mieux comprendre le mecanisme d’action intracellulaire du mitotane sur le modele cellulaire humain corticosurrenalien H295R. L’etude par spectroscopie NMR du contenu en metabolites et composes energetiques met en evidence, pour la premiere fois, une diminution significative (-40 %) de l’aspartate associee a une augmentation ( + 30 %) du glutamate, sous mitotane de facon temps (des 6 h) et concentration (des 10 mM) dependantes. Cette signature specifique pourrait refleter la depletion intracellulaire en NAD + secondaire au dysfonctionnement de la chaine respiratoire mitochondriale. Les analyses de lipidomiques des contenus intracellulaires et intramitochondriaux en phospholipides montrent une augmentation significative du rapport phosphatidylserine/phosphatidylethanolamine sous mitotane, compatible avec une inhibition de l’activite de la phosphatidylserine decarboxylase (PISD), enzyme localisee dans les zones d’interaction entre reticulum endoplasmique et mitochondrie appelees MAM. Les western-blots demontrent que l’expression proteique d’autres composants du MAM (PISD, DRP1 ou ATAD3A) est inhibee par le mitotane. Enfin, le PK11195, inhibiteur de TSPO, recepteur du cholesterol present sur les MAM, agit en synergie avec le mitotane, conduisant a un effet pro-apoptotique, desequilibrant la fission/fusion mitochondriale (immunocytochimie) et inhibant la steroidogenese (LCMS-MS). Ce travail suggere que les MAM constituent le complexe moleculaire cible du mitotane. L’inhibition de TSPO potentialise l’effet cytotoxique du mitotane et pourrait constituer une nouvelle voie pharmacologique pertinente.