Condições ideais de pH e temperatura para a atividade da NTP dase em linfócitos de pacientes imunodeprimidos pela infecção causada pelo HIV
2016
A NTPDase (ecto-apirase, ecto-difosfoidrolase, CD39, EC 3.6.1.5) e uma enzima identificada como antigeno de superficie de celulas linfoides, cuja maior expressao leva a um aumento da hidrolise do ADP e ATP nessas celulas. O objetivo, neste trabalho, foi caracterizar a enzima NTPDase em linfocitos de pacientes imunodeprimidos pela infeccao causada pelo HIV, determinando condicoes ideais in vitro para sua atividade. As amostras utilizadas foram provenientes de pacientes HIV-positivos atendidos no ambulatorio de Doencas Infecciosas do Hospital Universitario de Santa Maria. Os linfocitos foram isolados de sangue total coletado com EDTA e separados em Ficoll-Hystopaque em gradientes de densidade. As amostras foram incubadas tendo ATP e ADP como substratos e a atividade enzimatica determinada medindo a liberacao de fosfato inorgânico atraves de ensaio colorimetrico, com verde de malaquita como reagente. Em linfocitos de pacientes HIV positivos, observou-se uma atividade maxima da enzima em temperatura de 37oC e pH 8,0 tanto na hidrolise de ATP como na hidrolise de ADP.
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