miR-196a调控HOXA5对人胃癌细胞MGC-803侵袭转移的影响及机制研究

2014 
目的:检测miR-196a在人胃癌组织及细胞系中的表达,探讨抑制或过表达miR-196a对胃癌细胞侵袭转移能力的影响,以及其可能作用的靶基因。方法通过实时定量PCR技术检测胃癌组织及细胞系中miR-196a的表达水平,通过转染miR-196a inhibitors或mimics抑制或上调其表达,并通过定量PCR检测转染效率。利用划痕迁移实验、Transwell侵袭实验和MTT实验检测上调或下调 miR-196a 水平对 MGC-803细胞的迁移、侵袭和增殖能力的影响。采用生物信息学及Western blotting方法验证miR-196a对靶基因HOXA5的调控机制。结果相对于正常胃黏膜组织及细胞,胃癌组织和细胞系中miR-196a的表达水平显著上调(上调约28倍,P<0?01),MGC-803细胞中转染miR-196a inhibitors或mimics能显著抑制(下降了53%,P<0?01)或上调(上调约8倍,P<0?01) miR-196a表达水平。抑制miR-196a表达能降低MGC-803细胞的迁移、侵袭和增殖能力,而上调其表达则相反。 miR-196a能够负性调控HOXA5的表达。结论胃癌组织及细胞系中miR-196a的表达上调可能通过抑制HOXA5的表达显著提高胃癌细胞的侵袭转移能力,促进胃癌的发生、发展。
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