Expressão gênica de tiorredoxinas h em eucalipto em resposta ao estresse salino
2020
Eucalyptus grandis e a primeira especie de eucalipto que teve seu genoma totalmente
sequenciado e publicado em 2014. A planta e de grande interesse economico para o Brasil
que dispoe atualmente de uma area plantada de 7,84 milhoes de hectares para a producao
de celulose. A especie tambem permanece alvo de estudos de melhoramento via obtencao
de hibridos e de transformacao genetica para a producao de plantas transgenicas algumas
ja liberadas para o plantio experimental. O objetivo deste trabalho e estudar a expressao
genica de tres genes que codificam tiorredoxinas citoplasmaticas de E. grandis,
Eucgr.F01604.1, Eucgr.F01854.1 e Eucgr.I02383.1. A abordagem tecnica em questao
envolve analises in silico e em uma condicao de resposta ao estresse salino em plântulas
em laboratorio bem como em individuos adultos mantidos em plantio experimental. A
metodologia utilizada para obtencao de plântulas consiste em submeter sementes
peletizadas em placas contendo papel de filtro umedecidos em solucoes com duas
concentracoes de NaCl, alem do controle em tres tratamentos, controle, 50mM e 100mM de
NaCL. As plantas adultas sao especimes do experimento TECHS (Tolerância de Eucalyptus
Clonais aos Estresses Hidrico, Termico e Biotico) mantido na Unidade Academica
Especializada em Ciencias Agrarias da Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Os
ensaios de RT-PCR foram realizados a partir de extracoes de RNA total das plântulas
submetidas ao estresse salino e de plantas adultas do TECHS. Bibliotecas de cDNA foram
obtidas a partir do RNA total extraido do material vegetal e realizadas reacoes de PCR com
os oligonucleotideos iniciadores especificos para os tres genes estudados. A expressao
genica semi-quantitativa foi estimada em geis de eletroforese de DNA. Uma analise in silico
das sequencias promotoras dos genes estudados tambem foi realizada para identificar
dominios de ligacao a proteinas reguladoras envolvidas com a resposta ao estresse salino.
Os resultados obtidos mostram que plântulas de E. grandis respondem ao estresse salino e
constituem um bom material vegetal para analise funcional de genes de plantas. Ao mesmo
tempo, observa-se uma correlacao entre a resposta ao estresse salino e a possivel
intervencao de fatores de transcricao como e o caso de MYC1 em coexpressao com o gene
Eucgr.F01604.1
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