兔骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定及DiI荧光标记

目的：探讨兔骨髓间充质干细胞（MSCs）体外分离培养、表型鉴定和标记的方法。方法：采用密度梯度离心法及贴壁分离筛选法分离培养MSCs;采用免疫细胞化学方法检测细胞表面标志抗原CD29和CD106的表达,进行表型鉴定;DiI标记第3代MSCs,观察标记效率。结果：体外培养的原代MSCs48h内可见少量贴壁细胞,7～8d达到90%汇合;免疫细胞化学方法检测细胞表面标志抗原CD29,CD106为阳性;DiI进行细胞标记后,荧光显微镜下见所有MSCs均被标记为红色荧光,敏感性好,标记效率高。结论：此培养方法可以作为培养兔MSCs的常规方法,为构建组织工程尿道提供充足的种子细胞。