СИКВЕНС-СПЕЦИФИЧНОСТЬ БЕЛОК-ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫХ ВЗАИМО-ДЕЙСТВИЙ И ВЫДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ НА СОРБЕНТАХ, СОДЕРЖАЩИХ ИММОБИЛИЗОВАННЫЕ БЕЛОК-СПЕЦИФИЧНЫЕ ОЛИГОНУКЛЕОТИДЫ

На примере взаимодействия фермента биназы с олигодезоксирибонуклеотидами, иммобилизованными в гелевых ячейках биочипа, изучена сиквенс-специфичность белок-олигонуклеотидных взаимодействий. Определены константы преимущественного связывания с выбранными нуклеотидными последовательностями. Олигодезоксирибонуклеотиды GAGAGAG и GAGAGAGAG, специфически связывающиеся с биназой, использовали в качестве молекулярных зондов для создания аффинных сорбентов, предназначенных для выделения и концентрирования биназы из разбавленных водных растворов. Измерена рабочая емкость аффинных сорбентов с иммобилизованными олигодезоксирибонуклеотидами, составившая 2.6 и 2.3 мг биназы на 1 мл сорбента для GAGAGAG и GAGAGAGAG, соответственно. Показано, что олигонуклеотид-специфичность биназы после проведения аффинной хроматографии и элюирования с сорбента совпадает со специфичностью исходного препарата.