Generación y validación de un modelo animal ortotópico de cáncer de endometrio

Introduccion El cancer de endometrio es el mas frecuente de los tumores infiltrantes del tracto genital inferior femenino. El adenocarcinoma endometrioide representa el 80% de todos los carcinomas de endometrio. Otros tipos histologicos menos frecuentes son el seroso o el de celula clara. Los tumores de endometrio se clasifican en dos grandes grupos en funcion de variables clinicas, histopatologicas y de su perfil de alteraciones moleculares: el cancer de endometrio endometrioide o tumores tipo I, y cancer de endometrio no endometrioide o tumores tipo II. El sintoma guia del cancer de endometrio es el sangrado vaginal, que esta presente en el 90% de los casos. El tratamiento primario es quirurgico, lo que permite un correcta estadificacion de la enfermedad. La radioterapia externa es el tratamiento adyuvante que ha demostrado mejores resultados, disminuyendo la tasa de recurrencias loco-regionales. La quimioterapia esta indicada en casos avanzados al diagnostico o en las recidivas. Existen diferentes modelos animales preclinicos para terapias experimentales oncologicas. Los de inoculacion pueden ser ectopicos, si se desarrollan mediante la implantacion de celulas o de tejido tumoral fuera del organo en el que producen el tumor en el humano, u ortotopicos, si la inoculacion se realiza en el mismo organo en el que se produce el tumor en el humano. El modelo ortotopico ha demostrado que produce invasion tumoral y generacion de metastasis de forma similar a la observada en el humano. Objetivos Generar y caracterizar un modelo murino ortotopico de cancer de endometrio a partir de tejido tumoral humano de carcinoma de endometrio endometrioide y a partir de la linea celular comercial de cancer de endometrio Hec1A. Material y metodos 1. Linea celular. Se utiliza la linea celular comercial Hec1A transfectada con el gen de la luciferasa para generar celulas Hec1A-Fluc. 2. Animales. Se usan ratones hembras atimicos Swiss Nude y Balb-c Nude de 5 semanas. 3. Tejido tumoral endometrial. Se seleccionan dos muestras de tejido endometrioide a partir de cirugias que se realizaron por la Unidad de Ginecologia Oncologica de Hospital Vall d'Hebron. 4. Tecnica de inoculacion. Se estudian dos vias de inoculacion diferentes: la via transmiometrial y la transvaginal. 5. Seguimiento. Se evalua el seguimiento mediante bioluminiscencia in vivo en el modelo derivado de celulas Hec1A-Fluc, y mediante ecografia transabdominal y resonancia magnetica en el modelo desarrollado a partir de tejido tumoral humano. 6. Necropsia, estudio mediante bioluminiscencia ex vivo, estudio histologico e inmunohistoquimico. Resultados La tecnica de inoculacion transmiometrial es superior a la transvaginal. En el modelo ortotopico derivado de celulas Hec1A-Fluc, el 85% de los animales que presentaron tumor endometrial generaron ademas implantes pelvicos, diseminacion linfatica en el 92% de los animales e implantes abdominales en el 75%. Las metastasis hematogenas a pulmon se detectaron en el 71% de los animales. En el modelo ortotopico derivado de tejido tumoral endometrioide, el 77% de los animales presento diseminacion en la cavidad pelvica, y el 66% presento ademas implantes abdominales. Conclusiones 1. Es posible generar un modelo murino ortotopico de cancer de endometrio a partir de tejido tumoral humano endometrioide. Su perfil histologico e inmunohistoquimico es similar a los tumores de endometrio tipo I. Su perfil de diseminacion metastasica representa a un tumor localmente avanzado, con afectacion pelvica y ganglionar. 2. Es posible generar un modelo murino ortotopico de cancer de endometrio a partir de celulas Hec1A-Fluc. El seguimiento mediante bioluminiscencia in vivo permite el estudio del crecimiento del tumor y del perfil de desarrollo de metastasis. El estudio inmunohistoquimico del tumor es similar al del cancer de endometrio tipo II. El patron de diseminacion representa a un tumor altamente metastasico, con diseminacion linfatica, transcelomica y hematogena.