pH值对绿色木霉（Trichoderma viride）产纤维素酶的影响

采用微晶纤维素为唯一诱导性碳源，对绿色木霉（Trichoderma viride）在摇瓶发酵过程中控制与不控制pH产纤维素酶进行比较。控制pH时胞外蛋白浓度为0．72mg/mL比不控制pH时提高43％；FPA、EG、CB和CBH酶活为15．0U／mL，120．0U／mL，1．75U／mL，0．85U／mL分别是不控制pH时的2．1、2．3、11．7和1．7倍。在不同pH下测定纤维素酶液各酶活，表明pH值显著影响纤维素酶各单酶酶活。在pH2．7时，β-葡萄糖苷酶酶活仅为pH4．8时酶活的4％；pH回调试验结果表明β-葡萄糖苷酶对pH敏感，并在催化功能上发生不可逆变化。对纤维素酶液添加分离得到的各单酶，当添加β-葡萄糖苷酶时最多可以提高FPA酶活20％。因此肛葡萄糖苷酶是影响综合酶活的关键酶。通过拉曼光谱检测出β-葡萄糖苷酶在pH5．0有活性状态下，酶蛋白主链结构主要为a-螺旋和无规则卷曲；在pH2．0没有活性状态下，酶蛋白主链结构的无规则卷曲发生较大变化，a-螺旋也受到一定影响。这说明pH对β-葡萄糖苷酶构象的改变是造成其活性变化的主要原因。