脂多糖对肺动脉内皮细胞I型Na^＋／H^＋交换器表达的影响

目的：探讨脂多糖(LPS)对培养的牛肺动脉内皮细胞(PAEC)I型Na^+/H^+交换器(NHE-1)表达的影响及其与内皮细胞死亡的关系。方法：体外培养牛PAEC，MTT比色检测细胞存活率，并提取总RNA，应用反转录聚合酶镇式反应(BT-PCR)及DNA电泳技术，以NHE-1与β-actin电泳条带光密度值之比(e/c)作数据分析，以其比值反映NHE-1mRNA的表达程度。应用Fluo3/Amy荧光探针标记，激光共聚焦观察细胞内钙离子的浓度。结果：在LPS（0.01-1.0μg/ml）作用48h后，MTT比色吸光度值分别为0．35±0．07，0．31±0．07，0．26±0．04，低于对照组0．44±0．06(P＜0．01)。e／c分别为0．43±0．11，0．83±0．14，1．22±0．19，高于对照组0．28±0．08(P＜0．01，n＝4)。激光共聚焦结果显示LPS引起细胞内钙离子增多，呈剂量依赖型。结论：LPS可以引起肺动脉内皮细胞NHE-1表达增加，初制细胞增殖，导致细胞死亡，钙离子可能参与NHE-1的激活及表达。