Real time RT-PCR定量检测AFP mRNA表达水平方法的建立

目的建立realtime逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测AFP mRNA表达水平方法.方法提取BEL7402细胞总RNA,进行RT-PCR扩增并纯化AFP基因片段,构建重组质粒,建立real time RT-PCR检测AFP mRNA表达水平方法.结果重组质粒的阳性克隆效率为81.8%,经酶切鉴定,目的基因片段已插入PMD-18T载体内,得到realtime RT-PCR动力学曲线.结论成功建立了real time RT-PCR定量检测AFPmRNA表达水平方法.