How to obtain and isolate equine sternal bone marrow mononuclear cells with limited resources

Las lesiones musculoesqueleticas en caballos son frecuentes y conllevan a perdidas economicas substanciales. La fraccion de celulas mononucleares originadas de la medula osea, porcion que contiene celulas troncomesenquimales, ha sido aplicada exitosamente para mejorar la reparacion de lesiones musculoesqueleticas en esta especie. Diversos reportes sobre como obtener y aislar productos de origen medular han sido descritos; sin embargo, esos consideran la utilizacion de laboratorios altamente equipados. El objetivo del presente manuscrito es demostrar a medicos veterinarios que obtener y aislar celulas mononucleares de medula osea esternal para uso clinico es posible mediante equipos basicos de laboratorio. Muestras de medula osea de 10 caballos fueron obtenidas a partir de la 5a esternebra en jeringas de 60 mL conteniendo heparina y DPBS. Las muestras fueron procesadas dentro de 1 h posterior a la recoleccion usando instrumentos habitualmente encontrados en la mayoria de las clinicas equinas. Luego del aislamiento de la fraccion mononuclear, la concentracion y viabilidad celular de esta fueron determinadas por recuento en camara de Neubauer®. El concentrado final de 1 mL presento concentracion de celulas mononucleares (media ± DE) y un porcentaje de viabilidad de 190±54 x 106 y 98±1,2%, respectivamente. No se observo contaminacion en las muestras obtenidas y los caballos tratados con el concentrado medular usando esta tecnica no presentaron complicaciones clinicas. La aspiracion y el procesamiento de medula osea esternal equina usando la tecnica descrita es un metodo de bajo costo y seguro para obtener celulas mononucleares para terapias celulares.