Méthylisothiazolones : Synthèse d'allergènes marqués au carbone 13 et étude de leurs interactions avec des peptides par des techniques de RMN

Une des etapes cle dans le mecanisme d'induction de l'allergie de contact est la formation du complexe haptene-proteine. Afin d'elucider les bases moleculaires gouvernant ce processus, nous avons etudie les mecanismes d'interaction entre une famille d'allergenes, les methylisothiazolones, et certains peptides. Nous cherchons a proposer des mecanismes reactionnels menant a la formation du complexe, en utilisant la spectroscopie de RMN du carbone 13 et des correlations heteronucleaires 1H {13C}. Les isothiazolones sont les ingredients actifs de certains conservateurs utilises a des fins cosmetiques et d'hygiene. L'etude realisee est focalisee sur trois isothiazolones : la 5-chloro-N-methyl-isothiazolin-3-one (1), la 4,5-dichlo-N-methyl-isothiazolin-3-one (2), sensibilisants forts, et la N-methyl-isothiazolin-3-one (3), sensibilisant faible. Dans un premier temps, nous avons synthetise ces composes marques au carbone 13 sur les positions potentiellement reactives. Dans un second temps, nous avons realise des etudes sur des nucleophiles modeles, molecules cherchant a mimer les chaines laterales des acides amines impliques dans la modification. Ces etudes ont apporte des informations sur la reactivite, les adduits formes et les mecanismes impliques. Lors d'une troisieme phase, nous avons effectue des reactions de couplage avec des peptides dans des conditions plus physiologiques. Pour ce faire, nous nous sommes servis des informations obtenues lors des etudes avec les modeles. Les resultats de ces etudes montrent que 1 forme des adduits stables avec les histidines et les lysines. Dans ces memes conditions, 2 presente une grande reactivite mais il ne forme pas d'adduits stables et 3, presentant un caractere inerte, forme neanmoins des adduits labiles avec les cysteines. Par ailleurs, les taux de modification des lysines produits par 1 sont tres fortement augmentes en presence de thiols, cet effet pouvant etre responsable de l'activite biocide et allergisante de 1.