小肠黏膜下基质复合口腔黏膜细胞和转染TIMP-1 siRNA的成纤维细胞用于尿道重建的实验研究

目的：探索应用小肠黏膜下基质（small intestinal submucosa,SIS）复合口腔黏膜细胞（oral keratinocytes,OK）和转染金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）siRNA的成纤维细胞（fibroblasts,FB）构建组织工程化尿道的可行性。方法：分离培养OK,FB,并用TIMP-1siRNA转染FB,检测转染前后FB分泌Ⅰ型胶原的改变。剥离24只雄性兔子腹侧尿道黏膜2.0cm×0.8cm,并将其平均分为3组,每组8只。第1组应用单纯SIS修复,第2组应用SIS复合OK修复,第3组应用SIS复合OK和转染TIMP-1siRNA的FB修复。术后1个月、6个月行逆行尿道造影检查和组织学分析评估三组尿道重建的效果。结果：转染TIMP-1siRNA的FB分泌Ⅰ型胶原明显减少。逆行尿道造影下,第1组兔子中有5只尿道管腔通畅,第2组有6只,第3组有7只。组织学上,第1组在1个月时形成了不完整的尿路上皮,在6个月时纤维化和炎症较明显。第2组和第3组在1个月时形成了完整的尿路上皮,在6个月时纤维化和炎症较轻,且第3组生长的尿路上皮、平滑肌和血管较第2组明显增多。结论：OK和转染TIMP-1siRNA的FB可作为尿道组织工程中的种子细胞用于尿道修复重建,OK和转染TIMP-1siRNA的FB可抑制尿道瘢痕的产生。