Transforming growth factor-β/Smad signaling function in the aortopathies

OBJETIVOS: Fator transformador de crescimento (TGF) -β/ Smad como via de sinalizacao em casos de disseccao aortica e individuos normais nao foi descrito anteriormente. O presente estudo foi elaborado para avaliar as expressoes TGF-β/Smad como via de sinalizacao nos pacientes com disseccao aguda da aorta, em comparacao com que nos pacientes com aneurisma da aorta toracica e com doenca arterial coronariana, e (ou) com individuos saudaveis. METODOS: Pacientes cirurgicos consecutivos para o tipo A de disseccao aguda da aorta (20 pacientes), aneurisma da aorta (nove pacientes) ou doenca arterial coronaria (20 pacientes) foram selecionados para este estudo. Amostras de sangue (4 ml) foram obtidas a partir do cateter arterial radial direito apos heparinizacao sistemica antes do inicio da circulacao extracorporea na sala de cirurgia. Vinte e um voluntarios jovens e saudaveis, sem problemas de saude subjacentes que doaram amostras de sangue venoso do antebraco (4 ml) foram tomados como controle. Os especimes cirurgicos de tecidos aortico foram obtidos imediatamente apos terem sido cortados durante as operacoes da substituicao da aorta nos pacientes com disseccao aortica ou aneurisma da aorta. Em pacientes que foram submetidos a cirurgia de revascularizacao miocardica, os tecidos da aorta minusculos foram obtidos quando os orificios da anastomose proximal na parede anterior da aorta ascendente foram feitos. Os tecidos da aorta foram para a RNA, proteinas ou preparacoes sobrenadantes ate a deteccao de TGF-β1 mRNA pela reacao de transcricao reversa quantitativa em tempo real em cadeia da polimerase, de TGF-β1, receptor I de TGF-β, Smad2/3, Smad4 e Smad7 por Western Blot, e de TGF-β1 pelo teste de ELISA, respectivamente. Em particular, as correlacoes lineares dos tons de cinza relativo entre diferentes proteinas de cada grupo, e aquelas correlacoes entre os quantitativos TGF-β1 pelo teste de ELISA e o intervalo de tempo desde o inicio da cirurgia ou as dimensoes maximas da aorta do grupo de disseccao da aorta foram avaliados. RESULTADOS: Reacao de transcricao reversa quantitativa em tempo real em cadeia da polimerase mostrou que o mRNA TGF-β1 foi supra-regulado em todos os grupos cirurgicos (1,59 ± 0,33 vs 1,45 ± 0,34 vs 1,48 ± 0,48, P> 0,05). Western blot revelou que as expressoes de TGF-β1, receptor I de TGF-β, Smad 2/3, Smad4 e Smad7 foram positivos nos tecidos da aorta de todos os tres grupos investigados. Dos tons de cinza quantitativa relativa, uma correlacao inversa significativa foi observada entre TGF-β1 e Smad 2/3 (Y = 1,6417 +-0.8552X, r = -0,759, P 0,05). Os niveis de plasma TGF-β1 foram 1.158,30 ± 11,54 pg/ml, 1.170,27 ± 8,26 pg/ml, 1225,00 ± 174,42 pg/mL e 1.160,25 ± 13,01 pg/mL nos quatro grupos, respectivamente, mostrando diferencas significativas entre grupos (P <0,05). Nenhuma correlacao significativa foi encontrada entre a aorta ou niveis plasmaticos de TGF-β1 e o intervalo de tempo desde o inicio da cirurgia ou as dimensoes maximas da aorta nos pacientes do grupo de disseccao da aorta. CONCLUSOES: A disseccao aortica, aneurisma da aorta e arterosclerose podem estar associadas a uma via de sinalizacao TGF-β/Smad elevada, com disseccao aortica exibindo uma suprarregulacao menos proeminente. Isso poderia ter implicacoes para a ativacao do sinal a jusante, presumivelmente, traduzindo-se em degradacao da matriz na condicao de disseccao da aorta, em comparacao com deposicao de matriz no aneurisma da aorta e doenca arterial coronariana