Cinétique de la lipoperoxydation induite par les UVB dans les cultures de kératinocytes et de fibroblastes humains

Les ultraviolets entrainent une peroxydation des lipides de la peau. Le sujet de ce travail est de determiner la cinetique de cette peroxydation lipidique dans des cultures de keratinocytes et de fibroblastes humains adultes. Les cultures primaires de keratinocytes sont utilisees a confluence, et les fibroblastes sont utilises apres 5 a 10 repiquages. Les cellules sont irradiees par differentes doses d'UVB (0,75, 1,5 ; 3 et 4,5 J cm -2 ) puis remises en culture pendant 3 a 48 heures. La peroxydation lipidique est estimee par le dosage du malondialdehyde (MDA) libre dans le milieu de culture et dans les cellules grâce a une technique de chromatographie en permeation de gel couplee a GPLC. Parallelement, le relargage de la lactate deshydrogenase est evalue dans le milieu de culture. Une augmentation du MDA libre total est observee trois heures apres irradiation des cellules ; elle est dose dependante de 0,75 a 3 J cm -2 dans les cultures de keratinocytes et de fibroblastes. Le MDA est detecte a la fois dans le milieu et dans les cellules. Des 3 heures, 90 % du MDA se trouvent dans le milieu. Etude cinetique de la peroxydation lipidique : elle est effectuee pour la dose de 0,75 J cm -2 d'UVB. L'elevation du MDA est significative par rapport aux cultures temoins a partir de 12 heures. L'augmentation de MDA s'accroit a 24 heures de culture pour les fibroblastes alors qu'elle reste inchangee dans les cultures de keratinocytes a 24 et 48 heures. Le relargage de la LDH augmente avec le temps de post-irradiation, dans les deux types de cultures. L'effet cytotoxique des UVB sur les keratinocytes et fibroblastes humains en culture se traduit par une elevation de la peroxydation lipidique detectable pendant 48 heures apres l'irradiation. Un relargage de la lactate deshydrogenase est observee simultanement.