负载自体肿瘤抗原的成熟DC体外联合小剂量IL-2及IL-12增强CTL抗胃癌活性研究

目的 探讨在体外条件下负载自体胃癌细胞裂解物的成熟DC（matured dendritic cells loaded withautologous tumorl ysates，TL—mDC）联合小剂量白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）及白细胞介素-12（interleukin—12，IL-12）增强细胞毒性T淋巴细胞（eytotoxic Tlymphocytes，CTL）抗胃癌免疫效应。方法建立短期培养的原代胃癌细胞系作为靶细胞。负载自体胃癌细胞裂解物的成熟DC联合应用小剂量IL-2及IL-12体外刺激自体T细胞，制备胃癌特异性CTL。应用淋巴细胞增殖实验检测联合刺激后T细胞的增殖能力；应用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）试剂盒检测CTL对肿瘤的特异性杀伤活性；应用逆转录聚合酶链反应法测定CTL培养液中干扰素γ（interferon-γ，INF-γ的分泌水平。结果 TL—mDC体外联合小剂量IL-2、IL-12刺激组（组1），与单纯TL—mDC刺激组（组2）比较，具有高效刺激自体T细胞增殖的能力（P〈0．01）；2组分别与T细胞混合培养1周后，所获CTL上清液中INF-1的浓度分别为（3200．00±172．57）ng／L（组1）、（2700．00±83．18）ng／L（组2），差异有统计学意义（P〈0．01）；CTL（组1）对自体胃癌细胞的杀伤率显著高于CTL（组2）（P〈0．05），且CTL（组1及组2）对自体胃癌细胞的杀伤率显著高于对2株异体胃癌细胞的杀伤率（P〈0．01）。结论TL—mDC体外联合小剂量IL-2及IL-12有效提高了CTL对自体胃癌细胞的特异杀伤活性。