PCR-reverse line hybridization assay for rapid differentiation of slowly growing mycobacteria

目的 建立和评价以16S-23S rDNA间隔序列(ITS)为靶基因的PCR-反向线点杂交技术(RLB)快速鉴定慢生长分枝杆菌(SGM)的方法.方法 PCR-RLB检测70株分枝杆菌参考菌株、4株诺卡菌参考菌株、5株红球菌参考菌株、1株棒状杆菌参考菌株,来源于中国生物制品和药品鉴定所和悉尼大学感染性疾病和微生物中心;358株分枝杆菌临床分离株来源于深圳、广州和澳大利亚.结果 所有分枝杆菌参考菌株均可扩增出200～250 bp DNA片段,分枝杆菌引物可扩增4种诺卡菌和5种红球菌,但不与分枝杆菌属探针和种探针杂交.21个探针可鉴定分枝杆菌、结核分枝杆菌复合群、溃疡/海分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌a/b和堪萨斯分枝杆菌c亚种及其他16种SGM.结论 该方法能快速、简便和准确地鉴定SGM。