Molecular mechanism of up-regulated α-SMA expression in human proximal tubular epithelial cells induced by rIL-6

目的 观察白细胞介素6(IL-6)在体外对人近曲肾小管上皮细胞株(HK-2)信号转导因子和转录活化因子1(STAT1)酪氨酸磷酸化的影响,探讨IL-6刺激人近端肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的分子机制.方法 采用流式细胞仪检测10、25、50ng/mL浓度的IL-6刺激48 h后α-SMA阳性细胞表达百分数;采用Western blot方法检测0、5、10、25、50 ng/mL的IL-6刺激30min以及IL-6(25 ng/mL)刺激0、15min、30min、60min、120min后P-STATI蛋白的表达水平;同样方法检测,AG490预处理细胞4 h,IL-6(25 ng/mL)分别刺激30 min后及48 h后P-STAT1和α-SMA蛋白表达水平.结果 与刺激前比较,IL-6以剂量依赖方式上调α-SMA阳性细胞表达百分数;与刺激前比较,IL-6以时间和剂量依赖方式上调HK-2细胞P-STAT1的表达,高峰发生在30 min;AG490部分抑制STAT1激活,下调α-SMA蛋白的表达.结论 HK-2细胞中,信号蛋白STAT1酪氨酸磷酸化介导了IL-6诱导的α-SMA的表达,参与了肾间质纤维化的发病过程。