内参基因对 TYR、MITF和ASIP基因在白绒乌骨鸡各组织表达水平的影响

以健康白绒乌骨鸡肌肉、肾、肝、肌胃和皮肤为试验素材,应用实时荧光定量聚合酶链反应技术探讨β‐肌动蛋白（beta‐actin ,ACTB）、3‐磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde‐3‐phosphate dehydrogenase ,GA PDH）和18S核糖体RNA（18S ribosomal RNA ,18S rRNA ）3个内参基因的组织表达稳定性及其对酪氨酸酶（ tyrosinase ,TYR）、小眼畸形相关转录因子（microphthalmia‐associated transcription factor ,MITF）和刺鼠信号蛋白（agouti signaling pro tein ,A S I P）等目的基因在白绒乌骨鸡各组织表达水平的影响,并采用紫外分光光度法分析各组织黑色素沉积规律,从中筛选出理想的内参基因.geNorm和NormFinder软件分析结果显示,内参基因GA PD H在白绒乌骨鸡各组织表达稳定性最高,ACTB表达稳定性最低.相对定量和黑色素沉积结果表明,GA PDH作为内参基因时,各组织 MITF、TYR基因的相对表达量与黑色素沉积规律基本一致,表现为皮肤＞肾＞肌胃＞肝＞肌肉；ASIP基因的相对表达量与黑色素沉积规律正好相反,表现为肌肉＞肝＞肌胃＞肾＞皮肤,这与各目的基因对黑色素沉积的调控功能相符,即 MITF和 TYR 基因高表达有利于黑色素沉积,ASIP基因高表达则抑制黑色素沉积.而18S rRNA和ACTB作为内参基因时,各目的基因表达量未表现出上述规律,与其各自对黑色素沉积的调控功能不相吻合,没有达到理想的校正效果.表明 GA PD H基因稳定性最好,且能真正体现目的基因对黑色素沉积的表达调控,是校正目的基因在白绒乌骨鸡不同组织中mRNA表达量的最优内参基因.