Atividade antimicrobiana do ácido úsnico do liquen Ramalina sp. sobre micro-organismos de importância animal e humana

Liquens sao associacoes simbionticas constituidas em sua maioria em parceria com fungos ascomicetos (micobionte) e algas ou cianobacterias (fotobionte). Atualmente, sao conhecidos aproximadamente 630 compostos provenientes do metabolismo secundario de liquens, alguns com acao antimicrobiana. Foi testado o composto puro de acido usnico, proveniente do liquen Ramalina sp. sobre o crescimento in vitro dos fungos Candida glabrata ATCC2001, C. albicans ATCC10231, C. tropicalis ATCC28707, C. dubliniensis ATCC MYA-646, C. kefyr ATCC40039, C. parapsilosis ATCC22019 e C. guilliermondii ATCC6260. Em meio liquido, os micro-organismos (m.o.) foram tratados por diferentes concentracoes do acido usnico e foi observado o crescimento durante seis horas em estufa a 30C. Cada inoculo de m.o. (20 μL) foi padronizado por fotometria (D.O550nm McFarland 0,5). Em seguida foram plaqueados (50 μL) do inoculo cultivado na presenca do extrato e o tratamento controle e incubados ON. A permeabilizacao da membrana plasmatica das leveduras foi avaliada pela captacao do corante vital SYTOX Green de acordo com a literatura, com algumas modificacoes. A levedura C. glabrata foi incubada na presenca de 80 μg.mL de acido usnico por 24 horas. Aliquotas de 100 μL da suspensao de celulas da levedura foram incubadas com 0,5 μM de SYTOX Green por 1h a 25oC. As celulas foram observadas num microscopio de DIC (Axiophoto, Zeiss) equipado com um conjunto de filtro para a deteccao de fluorescencia de fluoresceina (comprimentos de onda de excitacao, 450-490 nm; comprimento de onda de emissao, 500 nm). Houve efeito inibitorio em todas as especies testadas. Para a especie C. kefyr a concentracao minima inibitoria foi de 38,5 μg.mL e para a especie C. glabrata foi de 80 μg.mL. As demais especies ainda estao sendo testadas para calculo da MIC. Os resultados da microscopia de fluorescencia sugerem que o acido usnico teve acao na membrana da levedura C. glabrata, pois a marcacao com o corante indica que houve permeabilizacao da membrana plasmatica.