Spectrophotometric analysis of yeasts: cytochrome spectra of medically important species

Objectif. Le propos de cette etude est de determiner le spectre d'absorption des cytochromes de levures d'interet medical et d'obtenir un outil fiable et facilement utilisable permettant d'etablir des parentes entre especes ainsi qu'une discrimination des levures pathogenes. Materiel et methodes. Vingt-neuf souches representant 15 especes differentes de levures pathogenes ou opportunistes, ainsi que leurs teleomorphes ont ete analysees. Les spectres d'absorption des cytochromes reduits ont ete obtenus a basse temperature directement sur des pâtes cellulaires, apres congelation dans l'azote liquide. Le spectre balaye va de 495 nm a 650 nm. Resultats. Les spectres des cytochromes reduits montrent des pics d'absorption typiques de cytochromes cα1 (545,5-547 nm), cytochrome b (555,8-559 nm) et cytochrome aa3α (595,5-606,5 nm), mais la presence d'un simple ou d'un double pic aa3α ainsi que la presence ou non d'un epaulement α2 du cytochrome c constituent des caracteristiques taxonomiques particulierement utiles: ― le premier ensemble regroupe plus de la moitie des especes testees. Ces levures presentent un simple pic d'absorption aa3α et un epaublement α2 net du cytochrome c. La position du maximum d'absorption aa3α qui varie beaucoup, de 595,5 nm a 601,5 nm, permet avec d'autres absorptions la discrimination des principales levures pathogenes, c'est-a-dire Candida albicans, Candida tropicalis, Candida viswanathii, Candida parapsilosis, Candida glabrata, Trichosporon cutaneum. ― le deuxieme ensemble est compose par Candida kefyr, Kluyveromyces marxianus et Saccharomyces cerevisiae, des especes qui possedent aussi un simple pic d'absorption aa3α mais qui ne presentent pas d'epaulement α2c. ― le troisieme ensemble regroupe des especes telles que Candida krusei et son teleomorphe Issatchenkia orientalis dont l'absorption aa3α, est constituee par un double pic, rarement retrouve chez les levures, a 597-597,5 nm/606-606,5 nm. Conclusion. Si une grande diversite de profils cytochromiques est retrouvee dans ces ensembles de levures, un trace caracteristique peut etre rapporte a chacune des especes etudiees et donc permettre la discrimination des levures pathogenes. En outre, les diverses souches d'une meme espece ainsi que les anamorphes/teleomorphes montrent une tres grande homogeneite de profils. Ces resultats confortes par d'autres donnees d'ordre biochimique ou serologique, soulignent que l'analyse des spectres cytochromiques constitue aussi un outil utile et fiable pour la taxonomie des levures