L’Hypoxie/hypercapnie préservent les cellules CD34+ en hypothermie par la prévention de la libération de fer libre

L’hypothermie induit des degâts cellulaires associes a l’augmentation du fer libre intracellulaire (FL) suivie par la peroxydation lipidique et l’alteration des fonctions physiologiques. Nous avons prealablement montre que l’exposition a un melange gazeux hypoxique/hypercapnique (HH) assure une preservation significative des cellules souches et des progeniteurs hematopoietiques CD34+ fonctionnels a 4 °C. Afin d’en expliquer le mecanisme, nous avons teste l’hypothese que la preservation induite par l’HH pouvait etre reliee a la stabilisation des lysosomes et du FL. Des cellules CD34+ de sang placentaire triees ont ete incubees en air ambiant (20 %O2/0,05 % CO2) ou en HH (5 % O2/9 % CO2) pendant 7 jours a 4 °C puis analysees. Les resultats montrent que l’exposition a HH maintient le FL (detecte par le test a base de Bleomycine) a un niveau physiologique, alors qu’il croit dans l’air ambiant. Ceci est associe a la preservation de l’integrite des lysosomes et a la survie de la majorite des cellules (test de l’apoptose). En revanche l’ajout de deferoxamine (chelatant le fer) ameliore considerablement dans l’air ambiant la preservation des cellules CD34+ ainsi que les progeniteurs engages. Le traitement prealable des cellules CD34+ avec l’agent lysosomotrope imidazole, qui destabilise les lysosomes, induit une augmentation du FL et une baisse importante de la viabilite cellulaire dans les deux conditions. Le melange gazeux HH maintient donc l’integrite des lysosomes, ce qui evite la liberation de fer intracellulaire induit par l’hypothermie et ses effets cytotoxiques. Ceci ouvre des possibilites technologiques pour optimiser la conservation des cellules souches sans congelation.