Charakterisierung von Translokation t(7;12)-HLXB9/TEL positiven akuten myeloischen Leukämien im Kindesalter und Identifizierung von Zielstrukturen des Transkriptionsfaktors HLXB9

Akute Leukamien im Kindesalter sind haufig durch numerische oder strukturelle chromosomale Aberrationen in den leukamischen Blasten gekennzeichnet. Fur das Verstandnis der Leukamieentstehung, der Auspragung unterschiedlicher Subtypen, sowie fur eine adaquate Risikostratifizierung und Therapieentscheidung ist eine detaillierte molekulargenetische Charakterisierung unerlasslich. Sauglings-AMLs mit einer Translokation t(7;12) sind durch eine auserst schlechte Prognose charakterisiert. Molekulargenetisch wird die Translokation t(7;12) durch die Bildung eines HLXB9/TEL Fusionsgens und eine starke Expression des Wildtyp HLXB9 Allels begleitet. Der Uberexpression von HLXB9 wird eine entscheidende Rolle in der t(7;12) vermittelten Leukamogenese zugeschrieben. Im ersten Teil dieser Arbeit wurden Genexpressionsanalysen an primaren Knochenmarksproben von t(7;12) und 11q23/MLL pos. Patienten durchgefuhrt und differentiell exprimierte Gene ermittelt. Unterschiede zwischen den beiden AML-Kohorten ergaben sich zum einen in der Expression von HOX-Genen, welche ausschlieslich in den 11q23 pos. Leukamiezellen verstarkt exprimiert werden. Zum anderen konnte anhand von Signalweg-Analysen gezeigt werden, dass die differentiell exprimierten Gene besonders Signalwege der Zell-Adhasion beeinflussen. Im zweiten Teil dieser Arbeit wurden direkte und sekundare Ziel-Gene von HLXB9 im HL60 Zellsystem beschrieben. Mittels ChIP-on-Chip Analyse wurden Promotoren identifiziert, an die HLXB9 als potenzieller Transkriptionsfaktor bindet. Mit Hilfe einer vergleichenden Genexpressionsanalyse von HLXB9 pos. und HLXB9 neg. HL60 Zellen konnte HLXB9 als transkriptioneller Repressor beschrieben und differentiell exprimierte Gene identifiziert werden. Anhand der beiden Screening-Methoden wurden vier ubereinstimmende Ziel-Gene (PTGER2, IL8, ZYXIN und ETS1) identifiziert. Fur diese Ziel-Gene konnte in den Array-Analysen und in der qRT-PCR gezeigt werden, dass HLXB9 an die entsprechenden Promotorregionen bindet, und dass zusatzlich die Genexpresssion der Ziel-Gene in den HLXB9 pos. Zellen vermindert wird. Fur PTGER2 konnte zusatzlich mit Hilfe einer HLXB9 Deletionsmutante gezeigt werden, dass die konservierte Homoodomane von HLXB9 fur die Regulation von PTGER2 notwendig ist. Des Weiteren wurde in dieser Arbeit gezeigt, dass HLXB9 die ATRA-induzierte Expression des Differenzierungsantigens CD11b verstarkt.