大鼠尿激酶SYBR Green I real time RT—PCR引物的设计

设计用于SYBR Green Ⅰ法实时定量逆转录多聚酶链反应（QRT—PCR）检测大鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子（uPA）mRNA的引物。从基因库获取靶基因及相关序列，充分收集和分析相关生物信息学数据，应用Oligo 6．22设计出一对长度为21bp的引物，其GC含量为52．4％；上下游引物3’最稳定二聚体和及发夹结构的能量分别为-1．5、-0．40kcal／mol和-3．5、-0．90kcal／mol，引物间最稳定二聚体为-3．1kcal／mol。5’端和中间AG值较高，高于3’端AG；引发效率分别455和403。实验证明，该引物能够高效、特异地实现对靶序列的检测，适用于SYBR GreenⅠ法实时定量检测（uPA）mRNA。