慢病毒介导的siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞MIF对VEGF-C表达的影响
2015
目的探讨慢病毒介导的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)的下调作用,分析MIF与血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)在乳腺癌细胞中表达的相关性。方法构建慢病毒/siRNA载体,转染乳腺癌MCF-7细胞。倒置荧光显微镜观察siRNA转染效率,实时荧光定量PCR检测MIF与VEGF-C的mRNA表达,Western blot法检测乳腺癌细胞中MIF蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清中VEGF-C分泌情况。结果成功构建稳定低表达MIF的乳腺癌细胞株。慢病毒介导的siRNA对人乳腺癌细胞MCF-7的转染效率超过80%,其能有效阻断MIF mRNA和蛋白的表达,同时VEGF-C的表达水平相应降低。结论构建的慢病毒载体能有效阻断乳腺癌细胞中MIF的表达。MIF可以调控乳腺癌细胞VEGF-C的表达。
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