过表达miR-205对顺铂诱导的肾上腺皮质癌细胞株SW-13凋亡的影响及其机制

2014 
目的研究过表达miR-205对顺铂(cisplantin,CDDP)诱导的肾上腺皮质癌细胞株SW-13凋亡的影响及其机制。方法设转染pcDNA3.1(+)-miR-205的SW-13细胞和转染pcDNA3.1(+)的SW-13细胞分别为实验组和对照组。在不同浓度顺铂作用下,采用CCK-8法比较两组细胞对CDDP敏感度;H33342及AnnexinV-FITC/PI荧光观察细胞凋亡,AnnexinV-PE/7AAD荧光流式细胞术检测细胞凋亡率;用Western blot检测目的蛋白的表达水平;qPCR检测相关基因mRNA水平的变化。结果不同浓度顺铂作用下,实验组细胞生长抑制率、凋亡率明显高于对照组(P<0.01,P<0.05);在0、20、30μg/ml浓度的CDDP处理后,实验组促凋亡蛋白Bax、Caspase-9以及E2F1和VEGF-A mRNA水平较对照组升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达则降低。结论上调SW-13细胞miR-205可降低E2F1、VEGF-A的表达水平,促进顺铂诱导细胞的凋亡,增强肾上腺皮质癌细胞对顺铂的敏感度。
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