Application of reverse dot blot in detection of drug resistance mutations in HIV-1

目的 以HIV基因组pol区序列为靶基因设计可鉴别HIV耐药性突变的寡核甘酸探针对,应用膜反向点杂交技术检测HIV-1耐药性点突变.方法 以临床提取HIV-1患者血清为模板,扩增产物与点在尼龙膜上的5对特异的寡核苷酸探针杂交.通过标记在PCR上游引物5'端的荧光素显色得到结果,并将其与测序结果进行对比.结果 采用反向点杂交共检测了9例野生型和21例突变耐药型样本,检测结果与测序结果符合率为74%.5对探针对于野生型和突变型的扩增产物均有较好的区分性,敏感性高且信号强弱与相应产物在样本所占比例相关.结论 应用膜反向点杂交技术检测HIV耐药性点突变敏感、简便、快速,具有较高应用价值。