Etude de l’auto-assemblage de la fibronectine plasmatique humaine : mécanismes et réponses cellulaires

La matrice extracellulaire est un reseau enchevetre de macromolecules variees, en etroite relation avec les cellules qu'elle environne. Les interactions bidirectionnelles qui s'etablissent entre les cellules et leur microenvironnement matriciel regulent mutuellement leur comportement et devenir. La diversite biochimique des constituants moleculaires de la matrice, leurs proprietes biophysiques, leur architecture tout comme leur dynamique representent autant de signaux regulateurs. Parmi les constituants de la matrice, la fibronectine (FN) est une glycoproteine structurale et fonctionnelle majeure intervenant dans de nombreux processus physiologiques et pathologiques. Ces fonctions diverses sont directement liees a la dynamique structurale de cette proteine et a sa capacite a interagir avec les autres molecules matricielles, dont elle-meme. Retrouvee sous forme soluble dans les fluides biologiques, la FN est incorporee dans les matrices insolubles sous forme d'assemblages supramoleculaires principalement fibrillaires mais aussi sous forme d'agregats. Ces assemblages sembleraient etre impliques dans des processus physiologiques et pathologiques distincts.Si l'etude des assemblages de FN est rendue possible par l'elaboration de modeles in vitro, les mecanismes de polymerisation et l'effet d'assemblages de structures definies sur le comportement cellulaire restent cependant a mieux elucider et constituent le cœur de ce travail.Les travaux ont donc consiste a elaborer des assemblages de FN, a caracteriser les mecanismes et structures impliques dans leur polymerisation, et a etudier leur influence sur un modele de cellules cancereuses ovariennes. D'autre part, des etudes preliminaires comparatives ont ete menees avec un analogue vegetal de la FN.L'irreversibilite de la denaturation thermique de la FN entraine la formation d'agregats de type amyloide. Deux populations d'agregats coexistent en solution. Cette agregation est correlee a une diminution de l'accessibilite des sites de liaison a la gelatine et des sites RGD, et a une diminution de l'incorporation dans les reseaux matriciels. De plus, si la FN sous sa forme agregee n'est pas cytotoxique pour les cellules etudiees, la modification de la conformation de la FN favorise leur migration isolee et aleatoire.Ces resultats soulevent la question de l'implication de ces agregats de FN dans des processus pathologiques tels que le developpement tumoral.