Etudes des mécanismes contrôlant la réplication du virus de l'Hépatite B dans le contexte de l'infection : rôle de la protéine virale HBx et des protéines cellulaires PRMT1 et Spindlin1

Dans le noyau des hepatocytes, le genome viral est organise sous la forme d'un mini-chromosome (ADNccc), associe a des histones et a des proteines non-histone. L'ADNccc est soumis a des modifications de la chromatine qui vont controler sa transcription. La proteine virale HBx, est essentielle a la replication virale. HBx joue un role fondamental dans l'etablissement d'une transcription active de l'ADNecc au cours de l'infection, cependant les mecanismes moleculaires mis en jeu restent encore a determiner. Dans le but d'elucider les mecanismes impliques dans l'activite transactivatrice d'HBx, nous avons isole par purification par affinite ses partenaires nucleaires. Deux proteines issues de cette purification ont fait l'objet d'une etude fonctionnelle : PRMT1 et Spindlinl. Nous avons montre que PRMT1 exerce une inhibition sur la transcription virale via son activite methyltransferase et qu'HBx est capable de contrecarrer cette activite. Nous avons montre par ChIP que Spindlinl est recrutee sur l'ADNecc au cours de l'infection ce qui correle avec une diminution des ARNm viraux. Nous avons mis en evidence par des experiences de « run-on » nucleaires que Spindlinl agit au niveau de la transcription du VHB. Enfin nous avons montre qu'HBx est capable de contrecarrer en partie cette repression en diminuant le recrutement de Spindlin1 sur l'ADNecc. Nous avons montre que Spindlinl reprime la transcription d'un autre virus a ADN, HSV1. Pour comprendre les mecanismes moleculaires mis en jeu par Spindlin1 dans la regulation de la transcription nous avons isole les partenaires de Spindlin1.