[Platelet activation in cardiology: methods, indications and therapeutic perspectives].

Une activation plaquettaire et/ou une hyperreactivite plaquettaire sont observees chez l'insuffisant coronarien. La cytometrie en flux permet une analyse des fonctions plaquettaires en sang total, alors que les techniques habituellement utilisees necessitent une separation plaquettaire ou sont realisees sur plasma, entrainant des modifications plaquettaires artefactuelles. Cependant, la cytometrie en flux n'est pas exempte de contraintes. Nous rapportons dans un travail realise chez le volontaire sain, utilisant deux marqueurs de la degranulation plaquettaire (CD62 et CD63) et deux marqueurs de l'activation du complexe GPIIb/IIIa (PACI et fibrinogene lie), les conditions preanalytiques necessaires a une etude clinique : 1) les prelevements doivent etre realises sur des tubes contenant des inhibiteurs des fonctions plaquettaires (theophylline, adenosine, dipyridamole), et non sur des tubes citrates ; 2) les echantillons sanguins doivent etre marques par les anticorps monoclonaux sans delai apres le prelevement, les plaquettes s'activant au cours du temps malgre une fixation des echantillons immediatement apres prelevement ; 3) l'immunomarquage est stable dans le temps et permet donc une analyse sur le cytometre de facon decalee, a condition d'utiliser pour les marqueurs de la degranulation (CD62 et CD63) une fixation par le PFA, alors que PACI et fibrinogene lie (complexe GPIIb/IIIa active) sont actives par le PFA; 4) les marqueurs d'activation plaquettaire peuvent etre analyses, en sang total, sur un fenetrage taille/structure sans immunomarquage plaquettaire utilisant un deuxieme fluorochrome. La standardisation des conditions preanalytiques pour l'etude des fonctions plaquettaires en cytometrie en flux est indispensable pour les essais cliniques futurs.