促红细胞生成素对乳鼠心肌细胞肥大及PI3K／Akt-eNOS信号转导通路的影响

目的探讨促红细胞生成素（EPO）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的肥大心肌细胞的影响，以及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）／丝氨酸苏氨酸激酶（Akt）-内皮型一氧化氮合酶（eNOS）信号转导通路在其中的作用。方法分离乳鼠心肌细胞，利用AngⅡ诱导建立心肌细胞肥大模型，以心肌细胞表面积和心钠素（ANF）mRNA表达作为心肌细胞肥大观察指标。观察不同浓度EPO对肥大心肌细胞的影响，并利用PI3K抑制剂LY294002和一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对其相关机制进行探讨，同时对细胞培养液中一氧化氮（NO）浓度进行检测，蛋白免疫印迹法检测磷酸化Akt（p-Akt）、Akt、磷酸化eNOS（p-eNOS）和eNOS蛋白表达情况。结果20U／ml EPO能抑制由AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，表现为心肌细胞表面积和ANF mRNA表达均减少（P〈0.05）。EPO能激活Akt，促进eNOS及p-eNOS表达增加（均P〈0.05），并使NO合成增加（P〈0.01）。LY294002和L-NAME能逆转EPO的抗心肌细胞肥大作用，减少NO产量（P〈0.05）。蛋白免疫印迹法检测显示，LY294002能够抑制EPO对p-Akt、P-eNOS和eNOS蛋白表达的促进作用，而L-NAME能抑制eNOS的磷酸化（均P〈0.05）。结论EPO能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，该作用可能是通过激活PI3K／Akt信号转导通路，促进eNOS表达与活化，从而促进NO的合成来实现的。