Obtaiment of Pudu (Pudu pudu) deer Embryos by the Somatic Nuclear Transfer Technique

Los objetivos de este trabajo fueron los de producir embriones de pudu, obtenidos por la transferencia de nucleos de fibroblastos de la oreja de pudu en ovocitos de un rumiante domesticos que es el bovino. Para posteriormente en un trabajo futuro proceder a la transferencia de embriones de pudu, al utero de hembras receptoras sincronizadas de otra especie. Se obtuvieron biopsias de 1 mm aproximadamente del borde externo de la orejas de dos ciervos pudu machos del jardin zoologico Buin-Zoo, Santiago de Chile. Las lineas celulares han sido establecidas y conservadas segun los protocolos utilizados para las bovinos. Los ovocitos son obtenidos por puncion del complejo cumulos-ovocito (COC).desde ovarios de vacas recuperados del matadero. Cada ovocito es enucleado y fusionado con un fibroblasto aislado insertado bajo la zona pelucida. La fusion de membranas celulares es obtenida por choques electricos. En cuanto a la cronologia, observamos que al segundo dia se forma una etapa de dos blastomeras, al tercer dia morulas de 8 a 16 celulas, y desde el cuarto dia se ha diferenciado como blastocisto, el cual al septimo dia termina por eclosionar de la zona pelucida La obtencion de blastocistos embrionarios indica que es posible obtener embriones de pudu mediante clonaje heteroespecifico, aunque, el porcentaje de exito obtenido es relativamente bajo. Queda aun por verificar la viabilidad de los embriones asi obtenidos despues de la transferencia in utero