In vitro medium-term conservation of "Bacopa monnieri" (L.) Pennell—The Memory Plus plant—under slow-growth conditions

espanolSe desarrollo un protocolo sencillo y eficaz para el almacenamiento de cultivos in vitro de crecimiento lento para la conservacion a mediano plano de los recursos geneticos de yemas de Bacopa monnieri (L.) Pennell. Se pueden almacenar yemas terminales, segmentos nodales y grupos de yemas multiples por mas de 20 meses en un medio basal solido Murashige y Skoog (MS) con 20 g L-1 de sucrosa y sin reguladores de crecimiento, en tubos de cultivo tapados con polipropileno o en frascos de cultivo mantenidos a 24±2 oC con fotoperiodo de 12 horas de oscuridad + 12 horas de luz, con irradiacion de 35-40 μmol m-2 s-1. Despues del almacenamiento se logro la multiplicacion de yemas en un medio MS que contenia 0,5 mg L-1 de N6-bencilo adenina (BA). Se logro que las yemas se elongaran y echaran raices en un medio MS libre de regulador de crecimiento. Las plantas con raices fueron transferidas al suelo, con 100% de exito. Tambien los plantines almacenados pudieron transferirse directamente de la condicion in vitro al invernadero, con una supervivencia del 80%. Las plantas establecidas en campo eran morfologicamente similares a las plantas madres. Empleando cromatografia liquida de alta presion (HPLC, sigla en ingles) la comparacion quimica del perfil de las plantas madre y las conservadas in vitro (despues de su establecimiento en campo) revelo similitud de los perfiles quimicos, lo que indicaba su fidelidad quimica. EnglishA simple and efficient protocol was developed for in vitro slow-growth storage of shoot cultures for medium-term conservation of genetic resources of Bacopa monnieri (L.) Pennell. Shoot tips, nodal segments and multiple-shoot clumps could be stored for more than 20 months on solid Murashige and Skoog (MS) basal medium with 20 g L-1 sucrose and with no growth regulators, in polypropylene-capped culture tubes or culture bottles maintained at 24±2°C with a 12 hour dark + 12 hour light photoperiod with 35–40 µmol m-2 s-1 irradiance. After storage, shoot multiplication was achieved in MS medium containing 0.5 mg L-1 of N6-benzyl adenine (BA). Shoot elongation and rooting were achieved in MS growth-regulator-free medium. The rooted plants were successfully transferred to soil with 100% establishment. The plantlets stored could also be transferred directly from in vitro to nursery conditions, with 80% survival. The field-established plants were morphologically similar to mother plants. Using HPLC, comparative chemical profiling of mother plants and in vitro conserved plants (after establishment in the field) revealed similarity in the chemical profiles, indicating their chemical fidelity. francaisUn protocole simple et efficace a ete mis au point pour la conservation in vitro a moyen terme de pousses de Bacopa monnieri (L.) Pennell en croissance ralentie. Des apex, des segments nodaux et des agglomerats de jeunes pousses peuvent etre conserves pendant plus de 20 mois sur milieu de base de Murashige et Skoog (MS) solide avec 20 g l-1 de saccharose sans regulateurs de croissance, dans des tubes de culture avec bouchon en polypropylene ou des fioles de culture maintenus a 24±2°C avec une photoperiode de 12 heures d’obscurite + 12 heures de lumiere et avec une intensite lumineuse de 35 a 40 µmol m-2 s-1. Apres conservation, la multiplication des pousses est realisee dans du milieu MS contenant 0,5 mg l-1 de N6-benzyladenine (BA). L’elongation des pousses et la formation de racines sont obtenues dans du milieu MS sans regulateurs de croissance. Les plantes avec racines sont transferees en sol avec succes (100 %). Les plantules conservees in vitro peuvent egalement etre placees directement en pepiniere, avec un taux de survie de 80 %. Les plantes ainsi obtenues sont morphologiquement similaires aux plantes meres. Les profils HPLC des plantes conservees in vitro (apres etablissement en champ) et des plantes meres sont similaires, indiquant que leur composition chimique est fidelement conservee.