Muscle aspartyl protease (cathepsin D) activity: detection using a chromophoric substrate and relation to wasting in DBA/2 mice implanted with leukemic L1210 tumor cells

On a examine la relation entre l'activite de l'aspartyl protease (AAP) du muscle squelettique et le deperissement chez des souris DBA/2 mâles inoculees avec des cellules tumorales L1210. L'emploi du substrat peptidique H-Pro-Thr-Glu-Phe-Phe(NO 2 )-Arg-Leu-OH, specifique aux aspartyl proteases, a permis de detecter une activite proteolytique dans plusieurs tissus incluant le muscle, en utilisant une procedure d'extraction visant a isoler les enzymes lysosomiales. La caracterisation biochimique et l'augmentation des taux musculaires apres un jeune ou l'injection d'endotoxine (ETX) suggere que l'activite enzymatique est probablement la cathepsine D. Le syndrome de deperissement accompagnant la tumeur a ete examine en comparant le poids du membre posterieur amaigri chez les animaux traites et temoins. Les souris DBA/2 inoculees par voie intraperitoneale avec de cellules L1210 ont developpe de multiples tumeurs solides dans le peritoine et les ascites ; la masse tumorale maximale a ete atteinte en 16 jours environ. Une reduction significative du poids du membre posterieur (16 ± 2%) et une augmentation significative (31 ± 8%) de l'AAP musculaire associee au developpement d'ascites et de tumeurs solides ont ete observees. L'activite AAP plasmatique a augmente significativement (240 ± 33%), alors que l'AAP hepatique et splenique a augmente (10-20%), mais pas de maniere significative. L'administration chronique de pepstatine, a raison de 30 mg.kg -1 .jour -1 pendant 7 jours, parallelement au developpement observable d'ascites et de tumeurs solides (environ 7 jours post-inoculation), a completement inhibe la perte de poids du membre posterieur et diminue l'augmentation d'AAP dependante de la tumeur tant dans le plasma que dans le muscle, sans modifier le developpement des tumeurs. Le report de l'administration de pepstatine de 3 jours a induit une plus faible inhibition (33 ± 13%) de la perte de poids du membre posterieur. Ainsi, la cathepsine D, ou une aspartyl protease similaire, semble etre une cle importante dans le syndrome de deperissement associe a la cachexie.