低氧诱导神经干细胞凋亡和 miR-26a 低表达

目的：初步探讨氯化钴（cobalt chloride，CoCl2）是否诱导神经干细胞（neural stem cells，NSCs）凋亡及其机制，探讨NSCs凋亡是否引起microRNA-26a（miR-26a）表达变化。方法：用不同剂量的CoCl2处理NSCs， CCK-8检测细胞活力；TUNEL检测细胞凋亡；建立CoCl2诱导NSCs凋亡的模型，将NSCs分为对照组和凋亡组，re-al-time PCR检测miR-26a-3p、miR-26a-5p、GSK-3β、Bcl-2、Bax和caspase-3的表达；Western blotting检测Bcl-2和Bax的蛋白水平。结果：CCK-8结果显示不同浓度（200、400和600μmol／L） CoCl2作用24 h，NSCs活力呈剂量依赖性下降（P＜0.05）。 TUNEL检测显示CoCl2（200、400和600μmol／L）作用24 h后NSCs凋亡率呈剂量依赖性增加（P＜0.05）。 Real-time PCR和Western blotting结果表明凋亡组miR-26a、GSK-3β、Bax和caspase-3表达增加，Bcl-2、Bcl-2／Bax蛋白水平下降（ P＜0.05）。结论：CoCl2（400μmol／L）作用24 h可建立NSCs凋亡模型，其机制可能与线粒体凋亡通路有关；NSCs凋亡时miR-26a表达减少。