Utilizaciónde lectina Pisum sativum y yoduro de propidio para la evaluaciónrápida de integridad de acrosoma en espermatozoidescaprinos

La lectina Pisum sativum (PSA)ha sido usada exitosamente como marcador de glicoconjugados localizadosen la membrana acrosomal interna, pero debido a las variaciones en los constituyentes de membranas existentes entre especies, su utilizacion requiere una validacion preliminar. Este estudio compara los resultados obtenidos en la tincion acrosomal con una combinacion de yoduro de propidio (PI) y PSA con la tincion Rosa de Bengala que se utiliza corrientemente como estandar, y ademas compara la interpretacion de los resultados obtenidos con la tincionPI/PSA por dos evaluadores independientes. En el experimento 1, semen de chivos fue colectado por vagina artificial, lavado del plasma seminal y tenido comparativamente con PI/PSA y con Rosa de Bengala, inicialmente en forma directa despues de la coleccion y posteriormente luego de preparar fracciones con diferente proporcion de espermatozoides vivos y muertos. En el experimento 2, semen de diferentes chivos congelado a -196° C en el diluyente a base de Tris, citrato y yema de huevo, fue descongelado a 37° C por 30 seg o a 65° C por 5 seg y los espermatozoides fueron tenidos con PI/PSA. La interpretacion de los resultados de integridad de acrosoma fue realizada por dos evaluadores independientes. Para comparar los resultados los porcentajes fueron transformados y las medias y correlaciones fueron calculadas por medio del paquete estadisticoSystat®. Los resultados muestran que la tincion PI/PSA y Rosa de Bengala da resultados similares y positivamente correlacionados (r = 0.99) y que la interpretacion de los evaluadores tambien fue positivamente correlacionada (r = 0.98). De acuerdo a lo anterior,se concluye que la tincion PI/PSA es util para la evaluacion rapida de integridad de acrosoma en caprinos.